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胞外囊泡通过三磷酸腺苷结合盒转运子G2调控肺腺癌耐药的作用研究

Effects of Extracellular Vesicles on the Drug Resistance of Lung Adenocarcinoma Cells by Modulating the ATP Binding Cassette Transporter G2

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]河北医科大学第四医院胸外科 [2]河北医科大学第四医院肿瘤研究所 [3]河北医科大学第四医院麻醉科
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关键词: 非小细胞肺癌 耐药 胞外囊泡 裸鼠 三磷酸腺苷结合转运蛋白G2

摘要:
目的 探讨携带三磷酸腺苷结合盒转运子G2(ATP binding cassette transporter G2, ABCG2)胞外囊泡(extracellular vesicle, EVs)调控肺腺癌耐药作用及其分子机制。方法 取人肺腺癌细胞A549,建立顺铂(cisplatin, CDDP)耐药的肺腺癌细胞A549/CDDP;利用梯度离心法提取A549及A549/CDDP细胞释放的EVs,分别命名为EVs1及EVs2。EVs1及EVs2干预A549细胞48 h后,细胞分别命名为A549-EVs1及A549-EVs2。利用PCDNA3.1-ABCG2重组质粒转染A549细胞,建立A549/ABCG2细胞;转染空载体的A549细胞命名为A549/PCDNA3.1细胞。以MTT检测计算细胞24 h对CDDP的耐药指数;Real time-PCR检测细胞、EVs中ABCG2基因表达;建立荷瘤裸鼠模型,分别接种A549及A549-EVs2细胞至裸鼠皮下,记为对照组及实验组。成瘤后腹腔注射3 mg/kg CDDP,每周1次,共2次。取皮下移植瘤组织,Real time-PCR检测ABCG2基因表达,流式细胞术检测皮下移植瘤细胞凋亡率。结果 以亲代细胞A549为参照,A549/CDDP、A549/ABCG2、A549/PCDNA3.1、A549-EVs1、A549-EVs2、细胞24 h对CDDP的耐药指数分别为7.17、10.06、1.02、1.19、5.40。各细胞中、EVs中ABCG2基因的表达水平相比较,A549/CDDP细胞高于A549细胞,A549/ABCG2细胞高于A549/PCDNA3.1和A549细胞,EVs2高于EVs1,A549-EVs2细胞高于A549-EVs1细胞(P(0.01)。实验组移植瘤体积、细胞中ABCG2基因表达高于对照组,而细胞凋亡率低于对照组(P(0.05)。结论 携带ABCG2基因的EVs可以调控肺腺癌细胞耐药。

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第一作者机构: [1]河北医科大学第四医院胸外科
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