摘要：
目的:了解Pc-3、HS766T两个胰腺癌细胞株DPC4基因的表达情况.方法:用Trizol试剂提取两个细胞株培养细胞的总RNA,用RT-PCR的方法合成DPC4的cDNA并经与标准cDNA电泳确认后,用Qiagen PCR纯外试剂盒纯化,将纯化的cDNA与克隆载体Pt-Adv连接,并用连接产物转化大肠杆菌,扩增后提取质粒,经酶切鉴定后,送上海博亚公司测序,并上网与基因库中DPC4的cDNA比较,同时观察两个细胞株肿瘤细胞的生长情况.结果:HS766T细胞无DPC4基因表达(同源缺失),Pc-3细胞存在DPC4基因表达,但其cDNA片段与理论值相比,短约200bp,上网BLAST的结果表明,在中间连接区,有一236bp的片段缺失.两个细胞生长观察表明,Pc-3细胞生长明显慢于HS766T.结论:胰腺癌细胞株HS766T中DPC4基因同源缺失,细胞具有生长快速的特点.胰腺癌细胞株Pc-3中有正常功能的DPC4表达,但该DPC4转录产物显示,在其连接区有一236bp的片段缺失.该片段缺失对DPC4功能的具体影响尚不明确.
