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基于PARG/PARP1/NF-κB 通路探究半夏泻心汤抑制结肠癌细胞恶性表型的机制

Banxia Xiexin Decoction suppresses malignant phenotypes of colon cancer cells via PARG/PARP1/NF-κB signaling pathway

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资源类型:
Pubmed体系:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ 卓越:领军期刊

机构: [1]成都中医药大学附属医院代谢性疾病中医药调控四川省重点实验室,四川成都610075 [2]成都中医药大学肿瘤研究所,四川成都610072
出处:
ISSN:

关键词: 半夏泻心汤 结肠癌 上皮间质转化( EMT) PARG/PARP1 /NF-κB 信号通路

摘要:
探讨半夏泻心汤( Banxia Xiexin Decoction,BXD) 对结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及作用机制。首先基 于UPLC-MS /MS 对半夏泻心汤入血成分进行鉴定,并利用HPLC 技术进行含量检测,然后分别用不同浓度的BXD 干预 NCM460 正常肠上皮细胞及HT29 和HCT116 结肠癌细胞,通过细胞增殖与活性检测-8( cell counting kit-8,CCK-8) 法检测BXD 对细胞活力的影响; 通过流式细胞术检测BXD 对细胞凋亡的影响,并采用Western blot 法检测BXD 对B 细胞淋巴瘤/白血病- 2( B-cell lymphoma /leukemia-2,Bcl-2) 、B 细胞淋巴瘤/白血病-2 相关X 蛋白( Bcl-2 associated X,Bax) 表达的影响; 通过细胞划 痕实验检测BXD 对细胞迁移能力的影响,Transwell 侵袭法检测BXD 对细胞侵袭的影响,并通过Western blot 法检测BXD 对上 皮间质转化( epithelial-mesenchymal transition,EMT) 相关蛋白如上皮型钙黏蛋白( epithelial cadherin,E-cadherin) 、神经型钙黏 蛋白( neural cadherin,N-cadherin) 、波形蛋白( vimentin) 表达的影响; 采用Western blot 及RT-qPCR 技术检测BXD 对聚( ADP- 核糖) 糖水解酶[poly ( ADP-ribose) glycohydrolase,PARG]/聚( ADP-核糖) 聚合酶1 [poly ( ADP-ribose) polymerase 1, PARP1]/核因子-κB p65( nuclear factor kappa-B p65,NF-κB p65) 信号通路蛋白及相关mRNA 表达水平的影响。结果表明, BXD 干预后,HT29 和HCT116 结肠癌细胞增殖能力减弱,BXD 可促进结肠癌细胞凋亡,促进Bcl-2 蛋白表达,抑制Bax 蛋白表 达; 同时,BXD 可以抑制细胞迁移和侵袭,使E-cadherin 蛋白表达升高,N-cadherin 和vimentin 蛋白表达降低; 此外,BXD 能抑制 PARG、PARP1、NF-κB p65 蛋白及其mRNA 表达。综上,BXD 可能通过介导PARG/PARP1 /NF-κB 信号通路从而抑制结肠癌 细胞恶性表型。

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第一作者机构: [1]成都中医药大学附属医院代谢性疾病中医药调控四川省重点实验室,四川成都610075
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