目的探讨血清中肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）及热休克蛋白90a（HSP90α）单独及联合检测在肝细胞癌（HCC）诊断中的临床价值。方法选取2017年1月至2019年10月在该院住院治疗的HCC患者191例（观察组）作为研究对象,另选取同期的肝硬化（LC）患者28例作为对照组。各组血清AFP、AFP-L3、HSP90α进行检测比较,并采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析其在HCC诊断中的价值。结果对照组天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素水平高于观察组,对照组清蛋白水平低于观察组,差异均有统计学意义（P(0.05）;两组肿瘤标志物AFP、AFP-L3、HSP90α水平比较,差异均有统计学意义（P(0.05）。AFP、AFP-L3、HSP90α诊断HCC时,AFP+AFP-L3+HSP90α联合检测诊断能力最佳。AFPL3是区分HCC早期和LC特异度较高的指标。AFP、AFP-L3、HSP90α水平随着HCC的巴塞罗那临床肝癌分期发展,ROC曲线下面积越大,诊断能力越明显。结论血清AFP、AFP-L3、HSP90α联合检测对HCC的诊断具有较高的临床价值。