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PPARδ基因RNA干扰慢病毒载体的构建及稳定干扰结肠癌细胞株KM12C的建立

[Construction of a lentiviral vector of RNA interference against PPARS gene and the establishment of colon cancer cell line KM12C with stable knockdown of PPARdelta expression].

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资源类型:
Pubmed体系:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]四川大学华西医院消化外科研究室 [2]四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室
出处:
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关键词: 过氧化物酶体增殖因子活化受体δ 结直肠癌 RNA干扰 慢病毒 KM12C

摘要:
摘要:大肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率和病死率正逐年递增。过氧化物酶体增殖因子活化受体δ(peroxisome pro1iferator-activated receptorδ,PPARδ)是结肠腺瘤性息肉基因通路的下游靶标,很可能参与了大肠癌发病机制。然而,目前对该基因在大肠癌中的功能尚未阐明。本实验采用慢病毒三质粒包装系统构建特异靶向人PPARδ基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARδ基因稳定沉默的结肠癌细胞株。测序证实,成功构建编码表达PPARδ短发夹结构RNA(sh-PPARδ)的慢病毒载体pLVshPPARδ以及对照载体pLVControl。病毒载体转导结肠癌细胞株KM12C后,荧光显微镜及流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)证实细胞转染效率>90%,RT-PCR测定实验组KM12C细胞PPARδ的mRNA表达比未处理细胞下降70%,对照组与未处理细胞无显著差异。Western blot显示实验组PPARδ蛋白表达量比未处理细胞明显下降,对照组与未处理细胞无显著差异。结果显示成功构建特异靶向人PPARδ基因的RNAi慢病毒载体,并成功建立PPARδ表达稳定干扰的人结肠癌细胞株KM12C,为PPARδ在大肠癌中的功能研究提供了新的细胞模型。

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第一作者:
第一作者机构: [1]四川大学华西医院消化外科研究室
通讯作者:
通讯机构: [1]四川大学华西医院消化外科研究室 [2]四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714):

资源点击量:46425 今日访问量:0 总访问量:3323 更新日期:2024-11-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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