【摘要】　目的　构建Ｍａｘ结合蛋白１（Ｍａｘ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　１，Ｍｘｉ１）基因的野生型和突变型真核表达载 体，观察表达载体转染真核细胞后蛋白表达的情况。方法　将正常人和白血病细胞株ＫＧ１细胞的Ｍｘｉ１野生型／ 突变型基因ｃＤＮＡ插入到红色荧光蛋白质粒ｐＤｓ－ｒｅｄ２－Ｎ１中，构建为ｐＤｓ－ｒｅｄ２－Ｎ１／Ｍｘｉ１（野生型／突变型）真核表 达载体；采用脂质体方法将质粒转染Ｃｏｓ－７细胞；荧光显微镜观察Ｃｏｓ－７细胞红色荧光蛋白表达情况。流式细胞仪 方法检测红色荧光蛋白中Ｍｉｘ１的基因表达率，以此计算转染效率。转染后４８ｈ提取细胞总ＲＮＡ，进行ＲＴ－ＰＣＲ 检测Ｍｘｉ１基因表达。结果　成功构建了一种ｐＤｓ－ｒｅｄ２－Ｎ１／Ｍｘｉ１（野生型／突变型）真核表达载体。荧光显微镜下 观察转染后Ｃｏｓ－７细胞可见红色荧光蛋白的表达；流式细胞仪检测野生型和突变型的转染效率以转染后前３ｄ较 高，并可持续至第６ｄ。质粒转染Ｃｏｓ－７细胞后均出现阳性Ｍｘｉ１基因转录产物。ＲＴ－ＰＣＲ方法可以检测到Ｍｘｉ１ 基因在Ｃｏｓ－７细胞中的表达。结论　Ｍｘｉ１的真核表达载体构建成功，通过脂质体的方法转染真核细胞中并在其 胞浆中表达。