目的：探讨低温冷藏（4℃）过夜离心法制作浆膜腔积液细胞块的可行性，并评估细胞块免疫组化对提高浆膜腔积液细胞学诊断的价值及其作为基因检测新标本来源的可行性。方法收集2011年至2013年间有组织学确诊的积液152例，均采用直接离心和低温冷藏过夜离心制作细胞块，同时均行传统涂片、细胞块HE染色、免疫组化及检测50例非小细胞肺癌积液细胞块EGFR基因突变情况。结果低温冷藏过夜离心法制作细胞块的成功率（100.0%）显著高于直接离心法（75.0%）（χ2=43.43，P＜0.001）；细胞块免疫组化的诊断准确率（92.1%）明显高于传统涂片（67.1%）和细胞块HE染色（72.4%）（χ2=29.99， P＜0.001）；EMA对癌性积液中的癌细胞诊断具有较高敏感性和特异性，TTF-1、CDX-2、CA125、GCDFP-15、P63和CgA分别对肺腺癌、胃肠腺癌、卵巢癌、乳腺癌、鳞癌和小细胞癌具有较高的敏感性和特异性；非小细胞肺癌积液细胞块EGFR基因突变检出率为44.0%。结论低温冷藏过夜离心法制作细胞块成功率高，操作简单，易于推广；细胞块免疫组化极大地提高了浆膜腔积液细胞学的诊断准确性，同时也可为个体化治疗基因检测提供一种新的标本来源。