资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510000
华南理工大学
[2]军事医学科学院生物工程研究所北京100071
[3]首都医科大学附属北京世纪坛医院肿瘤内科肿瘤治疗性疫苗北京市重点实验室北京100038
首都医科大学
首都医科大学附属北京世纪坛医院
出处：
ISSN：
关键词：
p16INK4a
四环素操纵子(Tet-on)可诱导系统
细胞骨架
F-actin
摘要：
目的 使用四环素操纵子(Tet-on)可控表达系统研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A(CDKN2A/p16INK4a)对MCF7乳腺癌细胞形态及细胞骨架的影响.方法 以p16INK4a表达缺失的MCF7乳腺癌细胞为宿主细胞,用慢病毒通过“两步感染法”建立MCF7-pTet-on-p16INK4a可诱导表达细胞系,加入诱导剂强力霉素(Dox)诱导目的基因表达;细胞计数检测细胞生长变化;采用免疫细胞化学染色检测上皮钙黏素(E-cadherin)表达,采用鬼笔环肽(phalloidin)标记纤维型肌动蛋白(F-actin),观察p16INK4a对细胞间黏附连接、细胞骨架的影响;用显微镜对细胞拍照后,用Image J软件进行形态分析.结果 成功建立了可诱导表达p16INK4a的MCF7稳定细胞系,Dox可以有效诱导p16INK4a的表达;诱导条件下稳定表达p16INK4a的MCF7细胞增殖受抑制,细胞体积增大,轮廓线延长;而对照MCF7细胞F-actin主要定位于胞质,p16INK4a表达的细胞内F-actin向细胞边缘分布增加.结论 p16INK4a在MCF7细胞中的表达可以导致细胞体积增大、细胞间黏附连接弱化、F-actin向细胞外周重新分布.
基金：
国家自然科学基金(31671432,81572799)%国家重点研发计划(2016YFC1303303)
PubmedID：
第一作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
梁剑青,王嫚娜,张峥嵘,等.细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A(CDKN2A/p16INK4a)在MCF7细胞中的可诱导表达并引起F-actin的重分布[J].细胞与分子免疫学杂志.2017,33(4):465-470.
