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◇ 统计源期刊
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◇ CSCD-C
文章类型:
机构:
[1]重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆 400016
重庆医科大学附属第一医院
出处:
ISSN:
关键词:
乳酸乳球菌
细粒棘球绦虫
Eg95
疫苗
摘要:
目的 构建乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,LL)为载体的细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)重组LL-Eg95(rLL-Eg95)疫苗,并研究其表达效率.方法 以pCD-Eg95为模板扩增Eg95基因,采用Xba Ⅰ和HindⅢ双酶切后插入pMG36e,构建重组质粒pMG36e-Eg95,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,抽提质粒进行双酶切鉴定;电穿孔转化乳酸乳球菌MG1363株,构建细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗,抽提质粒进行PCR鉴定.结果 重组质粒用双酶切鉴定可切出预期大小的片段,以具有罗红霉素抗性的重组LL中抽提的质粒为模板进行PCR可扩增出471 bp的Eg95基因;SDS-PAGE显示重组LL可表达相对分子质量为16.5×103的Eg95蛋白,表达蛋白约占菌体总蛋白的17%;免疫印迹表明表达蛋白可被细粒棘球蚴感染的鼠血清识别.结论 成功构建了细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗,表达的Eg95具有特异的抗原性.
基金:
国家自然科学基金(No. 30801052、No. 30671835、No. 30500423、No.30200239)资助
PubmedID:
第一作者:
第一作者机构:
[1]重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆 400016
推荐引用方式(GB/T 7714):
李文桂,欧兴坤,何爱琳.乳酸乳球菌介导的细粒棘球绦虫重组LL-Eg95疫苗的构建、鉴定及表达[J].四川大学学报(医学版).2023,54(6):1154-1158.