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文章类型：
机构：
[1]电子科技大学医学院附属肿瘤医院四川省肿瘤医院研究所基础研究中心四川省癌症防治中心放射肿瘤学四川省重点实验室.成都
四川省人民医院
四川省肿瘤医院
出处：
ISSN：
关键词：
慢病毒
短发夹核糖核酸
口腔鳞癌
放疗
二代测序
摘要：
目的:用高通量方法筛选口腔鳞癌放疗抵抗相关的激酶基因，为口腔鳞癌的临床治疗决策提供理论基础。方法:以慢病毒构建的短发夹核糖核酸(shRNA)激酶文库(含4 675个不同shRNA序列，覆盖709个人激酶基因)感染舌鳞癌Cal-27细胞，嘌呤霉素筛选去除未成功感染的细胞后，以光子射线进行照射(0、10和15 cGy)，然后继续培养3 d，以增加不同射线抗性细胞的丰度差异。提取细胞基因组DNA，利用PCR获得完整shRNA序列，同时每组引入不同标签序列，利用illumina平台进行二代测序，找出丰度发生显著变化的shRNA，其对应基因即为影响射线抗性的基因。结果:本次实验共筛选到5个影响口腔鳞癌放射线抗性的激酶基因，其中，PKLR和IPMK敲减后会增加射线抵抗，AURKB、ITPKB和DLG2敲减后会导致放射敏感，其高表达会导致患者对放疗耐受。结论:本研究利用shRNA慢病毒文库结合二代测序方法筛选到3个口腔鳞癌放射抵抗基因，但具体作用机制尚需进一步探究。
基金：
国家重点研发计划项目（2 0 1 7 Y FC 0 1 1 3 9 0 4 ) ; 四川省科技计划重点研发项目
( 2 0 1 7 SZ0 0 0 4 ) ;四川省科技支撑计划项目（2 0 1 5 SZ0053)
基金编号：
2 0 1 7 Y FC 0 1 1 3 9 0 4
第一作者：
第一作者机构：
[1]电子科技大学医学院附属肿瘤医院四川省肿瘤医院研究所基础研究中心四川省癌症防治中心放射肿瘤学四川省重点实验室.成都
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
罗丽萍,曹邦荣,马士淇,等.应用慢病毒shRNA文库结合二代测序筛选口腔鳞癌放疗抵抗相关分子[J].中华放射医学与防护杂志.2021,41(3):166-171.
