摘要:
研究在胶原海绵上间充质干细胞(MSCs)向软骨细胞的定向诱导,以及其对MSCs细胞增殖力、细胞周期的影响,为临床应用胶原海绵作为MSCs支架、修复软骨缺损奠定基础. 取大鼠股骨骨髓,经梯度离心法和贴壁法分离MSCs,用加有转化生长因子β1 10 ng/ml、地塞米松10-7 mol/L、转铁蛋白3 mg/ml 、胰岛素2 mg/ml的诱导因子培养基分别在胶原海绵、培养板中进行诱导,14 d后免疫组化检测II型胶原分泌情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法比较两者之间细胞增殖情况,流式细胞仪(FCM)检测各组细胞周期.14 d后,胶原海绵上及培养板中均诱导出表达II型胶原的软骨细胞,MTT法检测胶原海绵诱导组,和培养板诱导组细胞增殖值分别为0.9213±0.0312和0.5875±0.0258,两者间有显著性差异(P<0.05), FCM检测胶原海绵各组S期+G2/M期百分率,发现其与培养板中同期细胞相比有显著性差异(P<0.05),各组均未发现异倍体.结果表明在胶原海绵上,MSCs能定向诱导为软骨细胞,细胞增值能力更强,MSCs细胞DNA合成、细胞分裂增加,无异倍体产生,可作为一种较为理想的组织工程学支架.